A.限制酶去除不完全
B.平端連接
C.核酸外切酶污染
D.連接反應(yīng)溫度低于16℃
E.從限制酶消化中帶來太高濃度的磷酸鹽或其他鹽類
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A.限制酶失活
B.限制酶的星號活性
C.有其他限制酶污染
D.有抑制劑存在
E.測試DNA中有其他DNA污染
A.限制酶失活
B.有抑制劑如SDS,EDTA等存在
C.反應(yīng)條件不合適
D.DNA不純
E.DNA結(jié)構(gòu)(線形或超螺旋)的影響
A.儲(chǔ)存溫度不合適
B.稀釋后儲(chǔ)存
C.儲(chǔ)存緩沖液不合適
D.分裝后儲(chǔ)存
E.儲(chǔ)存緩沖液中蛋白濃度低
A.在限制與修飾系統(tǒng)中,修飾主要是甲基化作用,一旦位點(diǎn)被甲基化了,其他限制酶就不能切割了。
B.限制酶在DNA中的識(shí)別/切割位點(diǎn)的二、三級結(jié)構(gòu)影響酶切效率。
C.如果限制酶的識(shí)別位點(diǎn)位于DNA分子末端,那么接近末端的程度也影響切割。
D.已知某限制酶在一環(huán)狀DNA上有3個(gè)切點(diǎn),因此該酶切割這一環(huán)狀DNA,可得到3個(gè)片段。
E.能產(chǎn)生防御病毒侵染的限制酶的細(xì)菌,其自身的基因組中沒有該酶識(shí)別的序列。
A.限制酶無活性
B.存在抑制劑如SDS,EDTA
C.DNA不純
D.緩沖液組成不合適
E.DNA甲基化
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