多項選擇題如果DNA分子重組時，需要用平端連接，下列哪些方法可形成平末端（）。

A.3‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
B.3‘突出的粘末端用核酸酶切平。
C.5‘突出的粘末端用DNA聚合酶加dNTPs填平。
D.5‘突出的粘末端用核酸酶切平。
E.利用切口為平末端的限制酶。


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1.多項選擇題下列哪些因素對保證較高連接效率是有利的（）

A.高純度DNA。
B.載體與目的基因摩爾數(shù)之比為1：1。
C.載體與目的基因摩爾數(shù)之比為1：3~5。
D.連接反應(yīng)體系中DNA濃度較高。
E.連接反應(yīng)體系中DNA濃度較低。

2.多項選擇題下列與DNA重組連接相關(guān)的說法正確的是（）

A.不匹配的粘末端可通過部分填補后連接。
B.同聚尾法連接不僅連接效率高，也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS終止液抑制限制酶活性，將有利于重組連接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA連接酶反應(yīng)時的必須因素。
E.平末端連接時，在反應(yīng)體系中加入適量凝聚劑可提高連接效率。

3.多項選擇題下列關(guān)于同聚物加尾法的說法正確的是（）

A.其核心是利用末端轉(zhuǎn)移酶的功能，將載體和外源DNA的3‘端再加上一端寡核苷酸。
B.不易自身環(huán)化。
C.連接效率高
D.適用于CDNA克隆
E.可能會產(chǎn)生某種限制酶切位點。

4.多項選擇題構(gòu)建載體時，使用雙酶切相對于單酶切的優(yōu)點在于（）

A.避免載體自身環(huán)化
B.提高連接效率
C.控制外源基因的插入方向
D.便于轉(zhuǎn)化后的篩選
E.便于修改閱讀框

5.多項選擇題在DNA重組連接時，常采用連接頭連接（linker ligation），其作用是（）

A.引入某些限制酶切位點。
B.人工構(gòu)建載體。
C.增加調(diào)控元件。
D.調(diào)整閱讀框。
E.通過接頭引入與目的基因相同的限制酶位點，并對目的基因相應(yīng)酶切點進(jìn)行甲基化修飾保護(hù)，可保護(hù)目的基因不受限制酶破壞。