操作步驟：從人的（）獲取目的基因；目的基因與（）結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體；在基因表達(dá)載體中還應(yīng)插入（）和終止子。然后把基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的（），通過(guò)發(fā)育形成的牛體細(xì)胞含人的（），成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有（），證明基因操作成功。

如圖是將人類的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖，所用的載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。簡(jiǎn)述重組質(zhì)粒的主要過(guò)程包括：①（）；②（）；③（）。

科學(xué)家最初在做抗蟲實(shí)驗(yàn)時(shí)，雖然用一定的方法已檢測(cè)出棉花的植株中含有抗蟲基因，但讓棉鈴蟲食用棉的葉片時(shí)，棉鈴蟲并沒有被殺死，這說(shuō)明（）?？茖W(xué)家在研究的基礎(chǔ)上又一次對(duì)棉花植株中的抗性基因進(jìn)行了修飾，然后在讓棉鈴蟲食用棉的葉片，結(jié)果食用的第二天棉鈴蟲就死亡了。

利用基因工程進(jìn)行育種，可以培育出具有新性狀的植株，這種育種方式的優(yōu)點(diǎn)是：①（）；②（）。

基因工程操作的基本步驟是：①（）；②（）；③（）；④（）。

圖中科學(xué)家在進(jìn)行①操作時(shí)，要用同一種（）分別切割目的基因和運(yùn)載體，運(yùn)載體的黏性末端與目的基因DNA片段的黏性末端就可通過(guò)（）（鍵名）而結(jié)合，遵循（）原則。

在外源基因?qū)胄∈蟮腁細(xì)胞時(shí)，外源基因可能隨機(jī)地插入到該細(xì)胞的DNA中。這些細(xì)胞有的能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請(qǐng)分析外源基因插入后導(dǎo)致有些A細(xì)胞死亡的最可能原因（）。

被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。

此基因與細(xì)菌的質(zhì)粒相結(jié)合要依靠（）酶和（）酶，其作用部位是磷酸二酯鍵，然后將目的基因移植到酵母菌體內(nèi)，酵母菌在基因工程中叫（）。

④階段是否可使用不添加植物激素的培養(yǎng)基？理由是什么？