填空題

下面是將乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程及有關(guān)資料,請分析回答下列問題。
【資料1】巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營養(yǎng)型酵母菌,能將甲醇作為其唯一碳源,此時(shí)AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達(dá)【5’AOX1和3’AOX1(TT)分別是基因AOX1的啟動(dòng)子和終止子】。
【資料2】巴斯德畢赤酵母菌體內(nèi)無天然質(zhì)粒,所以科學(xué)家改造出了圖1所示的pPIC9K質(zhì)粒用作載體,其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組,將目的基因整合于染色體中以實(shí)現(xiàn)表達(dá)。

酶切獲取HBsAg基因后,需用()將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上,形成重組質(zhì)粒,并將其導(dǎo)入大腸桿菌以獲取()。

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