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具有 EcoRⅡ末端的外源片段只能以一個方向插入到 EcoRⅡ末端的載體中。
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限制性內(nèi)切核酸酶 BglⅡ識別的序列為 A GATCT,BamHI 識別的序列為 GGATCC,用它們分別切割載體 DNA和供體 DNA,不必使酶失活,就可以直接通過黏性末端連接法進行連接。
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用限制性內(nèi)切核酸酶切割載體、供體 DNA后,要加入 EDTA-SDS中止液使限制性內(nèi)切核酸酶失活,這樣有利于重組連接。
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