多項選擇題PCR 中使用的底物dNTP 應(yīng)該是()。

A.使用前應(yīng)將pH 值調(diào)至7.0-7.5
B.dNTP 濃度高可以加快反應(yīng)速度,但卻增加了出錯率
C.降低dNTP 濃度使反應(yīng)速度下降,但可以提高反應(yīng)特異性
D.Mg2+會與dNTP 結(jié)合,應(yīng)注意二者濃度之間的關(guān)系


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1.多項選擇題有關(guān)PCR 變性溫度的描述,你認(rèn)為正確的是:()。

A.為使DNA 變性完全,變性溫度越高、時間越長越好
B.按模板DNA 的復(fù)雜程度來調(diào)整變性溫度和變性時間
C.在90?97℃的溫度范圍,再復(fù)雜的DNA 分子也可變性成為單鏈
D.變性溫度過高時間過長,dNTP 破壞增加,對PCR 反應(yīng)產(chǎn)生不利影響

2.多項選擇題延伸溫度應(yīng)有如下特點:()。

A.一般為72℃
B.PCR 延伸時間越長,產(chǎn)物的得率越高
C.Tag DNA 酶在延伸溫度時有較高的酶活性
D.PCR 延伸時間根據(jù)待擴(kuò)增片段的長度而定

3.多項選擇題PCR 樣品制備時,應(yīng)注意:()。

A.應(yīng)有專門的區(qū)域制備模板
B.提取DNA 樣品和RNA 樣品時,要帶手套且經(jīng)常更換
C.純化樣品對污染有極大的影響
D.提取核酸所用的試劑要求新鮮配制或者適當(dāng)儲存未經(jīng)使用的試劑

4.多項選擇題PCR 反應(yīng)總為陰性時,應(yīng)該:()。

A.增加Taq DNA 酶的濃度
B.增加靶DNA 的量,或者取擴(kuò)增液再行PCR
C.增加擴(kuò)增循環(huán)或者降低退火溫度
D.提純樣品

5.多項選擇題PCR 反應(yīng)出現(xiàn)非特異產(chǎn)物時,應(yīng)該采取的措施是:()。

A.增加退火溫度
B.降低Taq DNA 酶濃度
C.減少引物濃度,減少退火及延伸時間
D.減少擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)