問答題

【計算題】已知噬菌體λ、φ×174和T2的DNA的外周長度分別為172nm、17.7nm和560nm，試計算1μm雙螺旋DNA的平均相對質(zhì)量。（核苷酸殘基對平均相對分子質(zhì)量為618。）

答案：（172＋17.7＋560）×1000/0.34=2.21×（10）⁶（bp）=1.36×（10）⁹

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【簡答題】一個約有5000堿基對的小型雙鏈環(huán)狀病毒DNA，它含有由72bp直接串聯(lián)成的重復(fù)順序。這72bp片段中有一個EcoRI的切點，病毒的其他部位不含有這個切點。為了揭示該72bp重復(fù)順序的功能，現(xiàn)打算去除一個72bp片段，試描述構(gòu)建這樣一種修飾性病毒染色體的方法及其所需的酶。

答案：設(shè)原片段為（AB）n，用EcoRI切割，從水解產(chǎn)物分離出重復(fù)序列（n－1）（BA）和兩個片段5′-A與B-3′，用3′-...

【簡答題】入噬菌體DNA是線狀雙鏈DNA，具有重疊互補的末端（“粘性末端”）。DNA連接酶可以將λDNA連成閉合的環(huán)狀DNA。用細(xì)菌堿性磷酸酯酶或牛脾磷酸酯酶預(yù)處理線狀λ噬菌體DNA可以避免DNA連接酶對它的環(huán)化，試作出解釋。

答案：連接酶要求被連接的底物DNA的5′端有磷酸基團(tuán)。