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【計算題】已知噬菌體λ、φ×174和T2的DNA的外周長度分別為172nm、17.7nm和560nm,試計算1μm雙螺旋DNA的平均相對質(zhì)量。(核苷酸殘基對平均相對分子質(zhì)量為618。)
答案:
(172+17.7+560)×1000/0.34=2.21×(10)
6
(bp)=1.36×(10)
9
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問答題
【簡答題】一個約有5000堿基對的小型雙鏈環(huán)狀病毒DNA,它含有由72bp直接串聯(lián)成的重復(fù)順序。這72bp片段中有一個EcoRI的切點,病毒的其他部位不含有這個切點。為了揭示該72bp重復(fù)順序的功能,現(xiàn)打算去除一個72bp片段,試描述構(gòu)建這樣一種修飾性病毒染色體的方法及其所需的酶。
答案:
設(shè)原片段為(AB)n,用EcoRI切割,從水解產(chǎn)物分離出重復(fù)序列(n-1)(BA)和兩個片段5′-A與B-3′,用3′-...
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問答題
【簡答題】入噬菌體DNA是線狀雙鏈DNA,具有重疊互補的末端(“粘性末端”)。DNA連接酶可以將λDNA連成閉合的環(huán)狀DNA。用細(xì)菌堿性磷酸酯酶或牛脾磷酸酯酶預(yù)處理線狀λ噬菌體DNA可以避免DNA連接酶對它的環(huán)化,試作出解釋。
答案:
連接酶要求被連接的底物DNA的5′端有磷酸基團(tuán)。
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