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【簡答題】什么是熱啟動？
答案：
在模板DNA完全變性后再加入DNA聚合酶（或使DNA聚合酶有活性）的方法，可減少低溫下DNA聚合酶活性造成的非特異性擴增...
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【簡答題】常用的促進(jìn)PCR特異性的試劑有哪些？
答案：
甲酰胺，DMSO，甘油，甜菜堿，PCRx Enhancer Solution。
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【簡答題】提高PCR反應(yīng)的特異性一般可以使用哪幾種方法？
答案：
A.引物設(shè)計：引物長度、堿基配對是否嚴(yán)格、GC%含量、退火溫度、引物濃度與純度、穩(wěn)定性、是否為簡并性引物等；
...
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【簡答題】什么叫PCR的反應(yīng)平臺？形成的原因可能是什么？
答案：
PCR反應(yīng)不是無窮的進(jìn)行，到了PCR后期，當(dāng)產(chǎn)物達(dá)0.3～1pmol/L時，由于產(chǎn)物的堆積，使原來以指數(shù)增長的速率變成平...
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【簡答題】PCR反應(yīng)一般分為幾個步驟？各步驟有什么特點？
答案：
A.變性：雙鏈DNA變成單鏈DNA。變性溫度的高低由G+C含量決定；變性時間由DNA鏈長度決定。常規(guī)PCR變性條件為94...
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【簡答題】PCR反應(yīng)中加入的二價陽離子有什么功能？常用的是什么離子？
答案：
緩沖液中二價陽離子的存在至關(guān)重要，因為耐熱DNA聚合酶需要游離的二價陽離子作為輔助離子，它影響著PCR的產(chǎn)量和特異性。常...
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【簡答題】PCR反應(yīng)中對于加入的dNTP有什么要求？
答案：
1.dNTP應(yīng)具有一定濃度：50-200μmol/L，不得低于10-15。濃度過高會抑制Taq酶活性，較低濃度可降...
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【簡答題】PCR中使用的DNA聚合酶有哪幾種，各具有哪些特點？
答案：
A.Klenow片段：為DNA聚合酶Ⅰ的片段，有聚合酶活性和3’~5’外切酶活性（最適37℃）；...
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【簡答題】引物設(shè)計的基本原則有哪些？
答案：
A.引物長度一般在20～24bp（≥16，≤30）：這樣長度的引物保證了不易形成雜合體；
B.（G...
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【簡答題】什么叫PCR的引物？什么叫特異性引物？什么叫簡并性引物？
答案：
引物：所謂引物，實際上就是兩段與待擴增靶DNA序列互補的寡核苷酸片段，兩引物間距離決定擴增片段的長度，兩引物的5&rsq...
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【簡答題】PCR反應(yīng)對模板有什么要求？
答案：
基因組DNA、噬菌體DNA、質(zhì)粒DNA、cDNA、mRNA、預(yù)先擴增的DNA均可作為模板。PCR反應(yīng)對模板純度要求不是很...
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